بررسی اصل قبح عقاب بلا بیان
در حقوق جزای اسلامی اصول بسیار مهمی دیده میشود که نه تنها در آن ایام بلکه در شرایط فعلی هم اهمیت خود را حفظ نموده اند. یکی از این اصول بسیار مهم و در رأس آن و به تعبیری یکی از اصول مسلم مذهب اسلام در امور کیفری اصل معروف قبح عقاب بلابیان و یا بعبارتی منع عقاب بلابیان می باشد یعنی تا زمانیکه عملی از ناحیه شارع به عنوان جرم تعریف نشده و مجازات شرعی هم برای آن معین نشده باشد، نمیتوان آن عمل را جرم دانست و برای آن مجازات تعیین نمود. این همان امریست که امروز تحت اصل قانونی بودن جرائم و مجازاتها در تمام قوانین کیفری دنیا دیده میشود. در آن زمان نیز شارع مقدس، جرائم هفتگانه زیر: سرقت – زنا – ارتداد – قذف – شرب خمر – سرقت مسلحانه و لواط را که مستحق حد بود تعریف نمود. و حد هر یک از آنها را هم بیان نموده است.
منظور از این اصل آن است که جرم و مجازات آن از طرف مقنن وضع شده باشد. در ایام قدیم چنین اصلی وجود نداشت. تنها قانون حمورابی و تا حدودی هم قوانین زردشت آنهم برای جلوگیری از انتقام شخصی برای پاره ای از جرائم که جنبه خصوصی داشتند (یعنی از جمله جرائمی بودند که از طرف فردی علیه فرد دیگر ارتکاب می یافت) مجازات تعیین نموده بودند. اما در حقوق جزائی اسلامی این امر جنبه کلی و همگانی یافت جرائم آن ایام و مجازات آنها تحت قاعده معین درآمد.
نه تنها برای جرائم خصوصی با پیروی از اصل معروف «چشم به جای چشم و دندان به جای دندان» مجازات قصاص برقرار گردید، بلکه برای بسیاری از جرائم که جنبه عمومی داشت، چون سرقت – زنا – شرب خمر – سرقت مسلحانه و غیره حد شرعی تعیین گردید.
فلاسفه مکتب کلاسیک معتقدند درست است که انسان به حکم طبیعت و غریزه خود مجبور به زندگی در اجتماع است و درست است که لازمه زندگی در اجتماع رعایت نظم و مقررات عمومی است، ولی بایستی این مقررات عمومی قبلاً بوی اعلام گردد تا مشارالیه بداند که از ارتکاب چه اعمالی ممنوع گردیده است. انسان هرگز قادر نخواهد بود بکمک قوانین اخلاقی و یا مذهبی حد و مرز اعمال مباح و ممنوع را بشناسد. فقط مقنن است که میتواند به نمایندگی از اجتماع این حد و مرز را تعیین و به اطلاع عامه برساند. هرگاه چنین اعلام قبلی به کسی نشده باشد، تعقیب بعدی وی برخلاف عدل و انصاف و منطق است. این استدلالات مورد قبول نویسندگان اعلامیه حقوق بشر قرار گرفت. ماده 18 اعلامیه حقوق بشر در این زمینه حاکی است: «...هیچکس را نمی توان مجازات نمود مگر بموجب قانونی که قبل از ارتکاب وضع و قانوناً مورد عمل قرار گرفته باشد...» نویسندگان این اصل آن چنان برای اصل قانونی بودن جرائم و مجازات ها اهمیت قائل بودند که با درج آن در اعلامیه حقوق بشر آنرا در ردیف سایر حقوق اساسی بشر قرار دادند.
امانوئل کانت یکی از فلاسفه طرفدار نظریه قرارداد اجتماعی معتقد است که هدف مجازات باید اجرای عدالت باشد و برای توضیح عقاید خود در این رابطه مثلی آورده، که به (تمثیل جزیره متروک) مشهور می باشد. وی می گوید فرض کنیم عده ای در جزیره دورافتاده تشکیل جامعه داده و با هم زندگی می نمایند. اینک به عللی افراد جزیره تصمیم به ترک جزیره و انحلال جامعه خود گرفته اند. باز هم فرض کنیم که مجرمی قبل از این مقدمات مرتکب قتل شده باشد. کانت معتقد است که آخرین وظیفه این جامعه قبل از ترک جزیره اعدام قاتل است. گرچه در چنین موقعیتی چون جامعه منحل می گردد و دیگر در آن جزیره جامعه باقی نخواهد ماند و بالنتیجه اجرای مجازات از نظر نفع اجتماعی امر کاملاً بی فایده ایست، معهذا «عدالت مطلق» و نظم اخلاقی که بالاتر و والاتر از نفع اجتماعی است وجوب چنین مجازاتی را مسلم و ضروری می نماید. مجرم بخاطر اجرای عدالت و اصل مسلم قانونی جرم و مجازات، بایستی مجازات شود. در مورد جرائم و مجازات ها کانت معتقد است که هدف اخلاق فقط خیر مطلق است و چون جرم عملی است که نظم اخلاقی را برهم زده است، لذا مرتکب باید مجازات شود تا بدین وسیله جبران اختلال نظم فراهم گردد.
بسیاری از دانشمندان، اصل قبح عقاب بلا بیان و یا به تعبیری اصل قانونی بودن جرائم و مجازات ها را مورد بررسی قرار دادند. و بهنگام بحث در عناصر متشکله جرم آنرا تجزیه و تحلیل می نمایند. ما تصور می کنیم که اولاً اصل قانونی بودن جرائم و مجازات ها یا به تعبیر شرعی اصل قبح عقاب بلا بیان، خود جزئی از اصل قانونی بودن حقوق جزاست. بنابراین شاید مصلحت آن باشد که مسئله در تحت زاویه وسیع تری مورد بررسی قرار گیرد. ثانیاً اصل قانونی بودن جرائم و مجازات ها ممکن است این توهّم را بوجود آورد که این اصل فقط در حقوق جزای ماهوی مؤثر بوده و در سایر قسمتها و از جمله آئین دادرسی کیفری تأثیری ندارد. و حال آنکه در آئین دادرسی کیفری نیز کلیه اقدامات و رسیدگی از جمله تشکیل محاکم – نحوه رسیدگی – حق دفاع متهم و غیره باید طبق مقررات و اصول قانونی باشد. بهمین علت هم ما تصمیم گرفتیم که به تبعیت از بعضی نویسندگان متأخر این مسئله را در محدوده وسیع تر مطالعه نمائیم. برای مطالعه این اصل نیز این فصل به دو مبحث تقسیم میشود. در مبحث اول پیدایش و تحولات اصل مزبور و دلائلی که بر وجوب آن وجود دارد و هم چنین انتقاداتی که نسبت به آن بعمل آمده مورد بحث قرار خواهد گرفت و در مبحث دوم اهمیت اصل مزبور از جهت قانون اساسی و محتوای این اصل ذکر خواهد شد.
فهرست مطالب
مقدمه
فصل اول – تعریف اصل قبح عقاب بلابیان یا اصل قانونی جرائم و مجازاتها
مبحث اول: پیدایش و تحولات اصل قبح عقاب بلابیان و بعبارتی اصل قانونی بودن جرم و مجازات و یا به تعبیری اصل قانونی بودن حقوق جزا
سوابق تاریخی
دلائلی که ضرورت این اصل را ایجاب می نماید
الف-دلائل منطقی
ب – رعایت آزادی های فردی
ج-رعایت نفع جامعه
د-تقسیم وظایف قوای مقننه و قضائیه
انتقاداتی که نسبت به اصل قانونی بودن حقوق جزا بعمل آمده است
الف – انتقادات مکتب تحققی
ب-انتقادات دول دیکتاتوری قرن بیستم نسبت به اصل فوق
تأیید مجدد اصل قانونی بودن جرائم و مجازات ها
مبحث دوم: اهمیت و محتوای اصل قانونی بودن جرم و مجازات
ضرورت قید اصل قانونی بودن حقوق جزا در قوانین اساسی
نتایج حاصل از ذکر این اصل در قانون اساسی
تخطی مقنن از اصل مزبور
محتوای اصل قانونی حقوق جزا و اصل قانونی جرم و مجازات
الف-قانونی بودن جرائم
ب: قانونی بودن مجازات ها
ج-دخالت قوة قضائیه
د-لزوم محاکمه قانونی
فصل دوم – ضرورت تفسیر قوانین ضمن مطمح نظر قرار دادن اصل قاعده قبح عقاب بلابیان
فرق تفسیر قوانین کیفری و قوانین دیگر با توجه به اصل قبح عقاب بلابیان
مبحث اول: روشهای مختلف تفسیر قوانین – اقسام تفسیر
الف – تفسیر مضیق
ب- تفسیر از طریق قیاس
ج – تفسیر موسع
مبحث دوم – تفسیر قوانین کیفری در ایران – طرد تفسیر از راه قیاس
قبول تفسیر منطقی یا توضیحی
رویة قضائی ایران در مورد تفسیر قوانین جزائی
فصل سوم: محدوده حقوق جزا در زمان – طرح مسئله
اصل عطف بماسبق نشدن قانون جزا و سوابق تاریخی آن
انتقادات بعضی از مکاتب نسبت به اصل قاعده قبح عقاب بلا بیان
مبحث اول – محدوده قانون در حقوق جزای ماهوی
اشکالات ناشی از تعیین تاریخ دقیق جرم
اشکال ناشی از تعیین قانون ملایم و مساعد
مقاله بررسی تعاریف و مفاهیم و تاریخچۀ شیوۀ بیان اکسپرسیونیسم در ارتباط با نقاشی ، معماری و شهرسازی
مقدمه :
هدف از انجام این پژوهش ، بررسی تعاریف و مفاهیم و تاریخچۀ شیوۀ بیان اکسپرسیونیسم در ارتباط با نقاشی ، معماری و شهرسازی می باشد . با تأکید بر اندیشه ها آثار و فعالیت های معمار و شهرساز بزرگ آلمانی به نام ( برونوتات ) و درت یابی به برخی از ویژگی های « شهر اکپرسیونیستی » می باشد .
برای پی بردن به این نکته که اولاً « شهرسازی » و « اکسپرسیونیسم » و ثانیاً « شهر اکپرسیونیستی » و « برونوتات » چه ارتباطی با هم دارند .
لازم است قبل از هر چیز معنی و مفهموم سبک اکسپرسیونست را بدانیم . و همچنین تاریخچه مطرح شدن آن در آلمان به دلایلی که گفته می شود . و نقش برونوتات در جنبش هنری اکپرسیونیستی این گشور روشن میگردد و همچنین با بررسی آثار و فعالیت های او برخی از ویژگی های شهر اکسپرسیونیستی مطرح می شود .
مفهوم کلی سبک اکسپرسیونیسم :
« اکسپرسیونیسم در لغت به معنی « بیانی » « هیجان گری » و « حالت گرایی» ترجه شده است .
هنرمند اکسپرسیونیست هدف اصلیش عوالم بشری و انسانی است . اکسپرسیونیسم ، شیوه ای در هنر است . که نه بر واقعیات عین طبیعت تأکید دارد و نه بر تصورات انتزاعی مبتنی بر آن واقعیات تأکید دارد . بلکه تلاش و کوشش می کند احساسات و عواطف ، حالات درون و ذهنیات هنرمند را به تصویر بکشد .
به عنوان مثال :
با توجه به معنی واژه « اکسپرسیونیسم » و با جمع بندی تعاریف مختصری که ذکر شد می توان گفت که این شیوه بیان ، راهی برای آزادسازی احساسات و فشارهای عاطفی و نیروهای معنوی درونی و بیان برداشت های ذهنی هنرمند از محیط و شرایط بیرونی است . و به نظر می رسد ، هنرمند اکسپرسیونیست برای تخلیه و آزادسازی نیروهای درونی خود ، غالباً سعی می کند از تأکیدی اغراق آمیز استفاده کند .
تاریخچه اکسپرسیونیسم در آلمان :
در مطالعه تاریخچه اکسپرسیونیسم ابتدا لازم است ، از نحوه به گار گیری این شیوه در نقاشی آغاز کنیم . در عالم نقاشی ، « ونسان ون کوک » را به عنوان مکتشف اکسپرسیونیسم جدید می شناسند و محور انسانگرایی به وضوح در تابلوهای او مشاهده می شود و همچنین تکنیک استفاده از رنگ کاملاً بیانگر این حقیقت است . « ادوارد مونگ » نوروژی که در سال 1892 به آلمان رفت و سالها در آنجا زندگی کرد . از جهات بسیار پدرذ اکسپرسیونیسم نوین در نقاشی آلمان به شمار می رود در آثار او و ون کوک رابطه نزدیکی وجود دارد . زیرا ادوارد مونگ معتقد است : « دیگر تصاویری از اندرون با مردانی که کتاب می خوانند و زنانی که بافندگی می کنند نکشید . باید از انسانهای زنده ای نقاشی کنیم که نفس می کشند ، رنج می برند و عشق می ورزند . من مجموعه ای از این تصاویر را خواهم کشید تا مردمخ مجبور شوند عنصر مقدس آنها را بشناسند و خود را در برابر آن سربرهنه کنند، چنانکه گویی در کلیسایند »
این عبارات ، نشانگر مقدس بودن زندگی انسانها و رنج و شادی مردم عادی برای هنرمند است . این « مردمی شدن هنر » آغازی است که دامنۀ آن به معماری هم کشیده شد . شبح و بیماری و مرگ که بر زندگی او سایه انداخته بود و این ترس و هراس همیشگی او ، موضوع غالب نقاشی ها و تابلوهایش را تشکیل می داد . « جیمز رانسور » فنلادی نیز از پیشگامان شیوۀ اکسپرسیونیست می باشد که نقاشی های او از قدت حیرت زده کردن تماشاگر برخوردار است . او با استفاده از خطوط لرزان ، و رنگ های ناسازگار در تابلوهایش ، نشان دهنده ی واکنش شخص در برابر دنیایی غیر انسانی است . که او را وادار به متموع می کند و با این شیوه در تماشاگر ایجاد حس هیجان می کند .
پاورپوینت درک و بیان محیط شهری
فایل پاورپوینت درک و بیان محیط شهری در معماری وشهرسازی،در حجم87 اسلاید قابل ویرایش.
بخشی از متن:
سه مفهوم اساسی در مبانی نظری طراحی محیط:
فرضیه Hypothesis: پیش بینی نتیجه یک عمل خاص.
مدل Model: راهی است برای درک واقعیت و دادن ساختار به آن واقعیت.
نظریه Theory: نظامی از انگاره ها و طرحواره های ذهنی که پدیده یک یا گروهی از پدیده ها را توصیف و تبیین می کنند.
نظریه Theory: نظامی از انگاره ها و طرحواره های ذهنی است که:
یک پدیده یا گروهی از پدیده ها را توصیف و تبیین می کنند.
علاوه بر توصیف جهان، شامل تحلیل آنها نیز می شود.
برای نظم دادن و تحلیل مشاهدات مورد استفاده قرار می گیرد.
فهرست مطالب :
بخش اول :تبیین جایگاه روانشناسی محیطی با استفاده از مبانی نظری هنجاری و اثباتی و مفهوم ابعاد محتوایی و رویه ای طراحی محیط
بخش دوم:بررسی فرآیندهای ادراک محیط
بخش سوم:مبانی ادراک محیط
بخش چهارم:رفتارهای فضایی در محیط کالبدی
این فایل با فرمت پاورپوینت در87اسلاید قابل ویرایش تهیه شده است.
علل عدم اجرای قانون مالیات بر ارزش افزوده و بیان علل تعلیق این قانون
بیان و علل وجود مسأله: 3
1-1 بیان مساله: 3
1-2دلایل وجود مساله: 4
2- تببین و علل بروز مساله: 4
2-1 تببین مساله: 4
2-2علل بروز مساله: 5
3-ادبیات موضوع: 7
3-1 تاریخچه مالیات برارزش افزوده: 7
3-2انواع مالیات بر ارزش افزوده: 9
3-3مبلغ مالیات بر ارزش افزوده چقدر است؟. 9
3-4مالیات بر ارزش افزوده شامل چه کالاهایی می شود؟. 9
4-پیامدهای مساله: 10
5-نتیجه گیری و ارائه راهکار: 11
منابع: 13
مطالعه بیان ژنهای کاسپاز3 وbaxدر سلولهای lncap تحت القای کمپلکس vo-salen
چکیده
در این پژوهش کمپلکس معدنیVO-Salenو 5-Br-meso-VO-Salenاز تراکم آلدولی اتیلن دی آمین سالسیل آلدهید در حضور ترکیب وانادیوم استیل استونات سنتز گردید. ابتدا قدرت آنتیاکسیدانی Salen به وسیلهی آزمون DPPHمورد ارزیابی قرار گرفت، نتایج نشان داد که Salen قدرت آنتیاکسیدانی بسیار ضعیفی در مقایسه با کمپلکسهای وانادیوم اکسید آن دارد. ارزیابی اثرات سمیت سلولی و ضد تکثیری کمپلکسهای Salen، VO-Salenو 5-Br-meso-VO-Salenنشان داد که رشد سلولهایLNCaP بعد از 16 ساعت تیماربه ترتیب با IC50 برابر با 276/736 ، 42/428 و 55/403 میکرومولار مهار گردید. جهت ارزیابی رویداد مرگ برنامهریزی شدهی سلولی، بیان کمی برخی از ژنهای کد کنندهی فاکتورهای مسیر سیگنالینگ مرتبط با آپوپتوزیس سلولی مورد بررسی قرار گرفت یافتههای حاصل از این آزمایشها نشان داد هر دو کمپلکسVO-Salenو 5-Br-meso-VO-Salen بیان کاسپاز 3 را به ترتیب به میزان 82/1 و 16/7 برابر القا میکند، القای بیان ژن bak توسط VO-Salenو نیز بیان ژن bax بهوسیلهی 5-Br-meso-VO-Salen ممکن است باعث پلیمریزاسیون پروتیئنهای Baxو Bakدر غشای میتوکندری شده و با بیان کاسپاز3 مسیر میتوکندریایی آپوپتوزیس ادامه یابد.
قسمتی از متن:
مرحله ی نسخه برداری معکوس در RT-PCR
نسخه های mRNA می توانند به طور قابل توجهی ایجاد ساختمان های ثانویه یا دایمر هایی نمایند که توانایی آنزیم نسخه بردار معکوس در تبدیل mRNA به cDNA را تحت تاثیر قرار می دهد. این امر از
دقت روش RT-PCR در تعیین کمیت mRNA های مختلف می کاهد(24).دو آنزیم نسخهبردار معکوس رایج،AMV-RT[1]و [2]MMLV-RT هستند. AMV-RT با دوامتر از MMLV-RT بوده و تا دمای 55 درجهی سانتیگراد پلیمریزاسیون قابل توجهی را حفظ مینمایند(25) و میتواند به رفع مشکل ایجاد ساختمان ثانویهی RNA کمک نماید. در مقابل MMLV-RTو مشتقات ساخته شده از آن توسط مهندسی ژنتیک به طور معنیداری فعالیت RNase H کمتری از AMV-RT دارند. از آنجا که کاهش فعالیت RNaseH میتواند در سنتز محصولات با زنجیره بلند موثر باشد، در صورتی که هدف از آزمایش تکثیر مولکول cDNA با اندازهی کامل باشد، ممکن است MMLV-RT گزینهی بهتری محسوب گردد(26).
مرحلهی نسخهبرداری معکوس را میتوان با استفاده از پرایمرهای اختصاصی یا پرایمرهای الیگو دی تی[3] انجام داد. استفاده از پرایمرهای اختصاصی mRNA ، باعث کاهش تکثیر زمینهای[4] میشود، حال آنکه استفاده از الیگو دی تی تعداد مولکولهای mRNA که میتوانند از یک نمونه کوچک RNA مورد آنالیز قرار گیرند را به حداکثر میرساند. پرایمرها میتوانند باعث انحرافی بارز در تعدادکپی mRNA محاسبه شده شوند(27).
1-1-15-مرحله واکنش زنجیرههای پلیمراز در RT-PCR
رایجترین آنزیم DNA پلیمراز مورد استفاده DNA– پلیمرازTaq[5] است که دارای یک فعالیت نوکلئازی 3´ → 5´ بوده، اما فاقد فعالیت اگزونوکلئازی اصلاح خطا میباشد. از اینرو، هنگامی که صحت
فرایند، هدف اصلی است استفاده از آن توصیه نمیگردد. ثابت میکائیلیس آنزیمهای دیگر میتوانند تا دو برابر متفاوت از Taq پلیمراز باشند که این امر اثری مستقیم بر دمای اتصال[6] موثر پرایمر دارد(27)، اما در هر بار تغییر آنزیم، شرایط آزمایش باید بهینه گردد و نتایج بهدست آمده ممکن است مستقیما قابل مقایسه نباشند.
غلظت های Mg2+ و dNTP نیازمند کنترل دقیق هستند، زیرا Mg2+ فعالیت آنزیم را تحت تاثیر قرار داده و مخلوط های dNTP نا متعادل باعث کاهش صحت عمل پلی مراز می شوند. همچنین Mg2+ باعث افزایش دمای ذوب یا Tm در DNA دو رشته ای شده و تولید کمپلکس هایی محلول با dNTPs می نماید. از این رو غلظت های بالای dNTP ها در فعالیت پلی مراز اختلال نموده و اتصال پرایمر را توسط کاهش Mg2+ آزاد تحت تاثیر قرار می دهد(28).
1-1-16-مفاهیم Real Time PCR
1-1-16-1-خط پایه
چرخه های ابتدایی PCR که طی آن تغییر اندکی در سیگنال فلورسنس ایجاد می گردد ( معمولا چرخه های 3 تا 15 ) را خط پایه[7] می نامند. تغییرات در شرایط واکنش و محیط می تواند میزان فلورسنس تولیدی را تحت تاثیر قرار دهد. به طور کلی سطح فلورسنس در هر چاهک متناسب با میزان مولکول هدف موجود در آن است. سطوح فلورسنس ممکن است به دلیل تغییرات در محیط واکنش که ایجاد یک سیگنال زمینه ای می نماید ، دچار نوساناتی شود. سیگنال زمینه ای به ویژه طی چرخه های ابتدایی PCR و قبل از تجمع معنی دار قطعه هدف مشهود تر است. طی این چرخه های ابتدایی PCR ، سیگنال زمینه ای تمام چاهک ها برای تعیین سطح فلورسنس خط پایه در تمام تیوب های واکنش مورد استفاده قرار می گیرد. در این حالت، هدف تعیین زمانی است که تکثیر قطعه مورد نظر به طور معنی داری بیش از سیگنال زمینه ای شود. که این امر اندازه گیری دقیقتر فلورسنس را تسهیل می نماید(29).
1-1-16-2-چرخه آستانه[8]
در Real Time PCR واکنش ها توسط یک نقطه زمانی ( یا یک سیکل PCR ) مشخص میگردد که در آن تکثیر قطعه هدف برای نخستین بار قابل تشخیص میگردد. این معیار معمولا چرخه آستانه یا ( CT ) نامیده میشود و زمانی است که شدت فلورسنس تولیدی در اثر تکثیر قطعات طی واکنش زنجیره ای پلیمراز تا سطحی بالاتر از میزان نسبتا ثابت فلورسنس زمینه ای افزایش مییابد. ملاک تعیین آستانه معمولا 10 برابر انحراف استاندارد Rn برای چرخه های اولیه PCR ( خط پایه ) است. آستانه باید در ناحیه ای قرار گیرد که PCR به صورت نمایی تکثیر می یابد. آستانه یک میزان عددی است که به هر واکنش نسبت داده شده و نشان دهنده یک نقطه از نظر آماری معنی دار در بالاتر از خط پایه محاسبه شده می باشد. برای بدست آوردن مقادیر صحیح CT لازم است که خط پایه دو چرخه قبل از میزان CT برای فراوان ترین نمونه قرار گیرد. به دامنه غلظت های آغاز کننده نمونه که منجر به مقادیر صحیح CT میگردد، دامنه دینامیکی گفته می شود(30).
فهرست مطالب
عنوان……………………………………………………………………… صفحه
فصل اول: مقدمه و تاریخچه
1-مقدمه. 2
1 -1- سرطان. 2
1-1-1- ویژگی های اساسی سلول های سرطانی. 3
1-1-2-عاملهای سرطان. 3
1-1-3-ژنتیک سرطان. 4
1-1-3-3- ژنهای مهار کنندهی تومور 7
1-1-5- بررسی سرطان پروستات از دیدگاه ژنتیکی. 8
1-1-6- مرگ سلولی آپوپتوزیس... 9
1-1-6-1- مسیر آپوپتوزیس... 10
1-1-6-2- مسیر خارج سلولی آپوپتوزیس... 11
1-1-6-2- مسیر داخل سلولی آپوپتوزیس... 12
1-1-6-3- تنظیم مسیر داخلی آپوپتوزیس از طریق پروتئینهای خانواده Bcl2. 13
1-1-7-ماشین آپوپتوتیک.. 15
1-1-7-1-کاسپازها و مسیرهای آپوپتوتیک.. 16
1-1-7-1-1-ساختار کاسپازها و فعالیت آنزیماتیک.. 16
1-1-7-1-2-ساختار پروکاسپازها 16
1-1-7-1-3- ساختارهای کاسپازهای فعال. 17
1-1-7-1-4-کاسپازهای عمل کننده 18
1-1-8-کمپلکسهای سالن. 19
1-1-8-1-کمپلکسهای نوع سالن. 20
1-1-8-1-1-جنبههای عمومی کمپلکسهای سالن. 20
1-1-8-1-2-کمپلکسهای قابل حل در آب سالن. 21
1-1-8-1-3-کمپلکس آهن سالن. 21
1-1-9- Real Time PCR.. 22
1-1-10-مقایسه ی Real Time PCR و PCR معمولی. 22
1-1-11 -فازهای PCR.. 23
1-1-12-اصول RT-PCR به شیوهی معمولی و Real Time. 24
1-1-13- Real Time PCR یک مرحلهای یا دو مرحلهای. 24
1-1-14-مرحله ی نسخه برداری معکوس در RT-PCR.. 25
1-1-15-مرحله واکنش زنجیرههای پلیمراز در RT-PCR.. 26
1-1-16-مفاهیم Real Time PCR.. 27
1-1-16-1-خط پایه. 27
1-1-16-2-چرخه آستانه. 27
1-1-16-3-منحنیهای استاندارد 28
1-1-17-تئوری Real Time PCR.. 29
1-1-17-1- روشهای مختلف تعیین کمیت به وسیلهی Real Time PCR.. 30
1-1-17-1-1-تعیین کمیت مطلق. 30
1-1-17-1-2-روش منحنی استاندارد برای تعیین کمیت نسبی. 30
1-1-17-2-منحنی ذوب و پرایمر دایمرها 30
1-1-17-2-1-پرایمر دایمرها 31
1-1-17-2-2-اثر پرایمر دایمرها بر PCR کمی. 32
1-1-18-رنگهای متصل شونده به DNA.. 32
1-2- پیشینهی تحقیق. 33
فصل دوم: مواد و روشها
2ـ مواد و روشها 42
2ـ1ـ ابزار مورد استفاده 42
2ـ2ـ رده سلولی. 42
2ـ3ـ مواد مورد استفاده 42
2ـ3ـ1ـ بافر PBS. 42
2ـ3ـ2ـ محیط کشت RPMI 1640. 43
2ـ3ـ3ـ آنتی بیوتیک.. 43
2ـ3ـ4ـ محیط کشت فریزینگ.. 43
2ـ3ـ5ـ محلولMTT. 43
2ـ3ـ6ـ بافر گلایسین. 44
2ـ3ـ7ـ محلول استوک EDTA (5/0 مولار) 44
2ـ3ـ8ـ بافر X5 TAE (Tris- Acetic acid-EDTA) 44
2-3-9- بافر بارگذاری. 44
2-3-10- پرایمرهای مورد استفاده 45
2-3-11-کیت Real Time PCR SYBR GeenI 45
2-3-12- سنتز کمپلکس VOS و 5BMVOS. 45
2-3-12-1- سنتز لیگاند شیفباز H2L1: 46
2-3-12-2- سنتز کمپلکسVOL1: 46
2-3-12-3- سنتز لیگاند H2L2 46
2-3-12-4- سنتز کمپلکس VOL2 : 47
2-3-13- سایر مواد 47
2-4- روشها 48
2-4-1- تعویض محیط کشت.. 48
2-4-2- کشت مجدد سلولها 48
2-4-3- ذخیره و نگهداری بلند مدت سلولها 49
2-4-4- حیات مجدد سلولها 51
2-4-5- شمارش سلولها با تریپان بلو 51
2-4-6- سنجش حیات سلولها با آزمون MTT. 52
2-4-7-استخراج RNA.. 52
2-4-8- الکتروفورز RNA بر روی ژل آگاروز 54
2-4-9-روشهای آشکار سازی RNA.. 54
2-4-10-RT-PCR.. 55
2-4-11- واکنش Real Time PCR.. 56
2-6-3- اجزای تشکیل دهندهی واکنش در Real Time PCR.. 56
2-7- روش مورد استفاده برای تعیین کمیت 57
فصل 3 نتایج
3- نتایج. 59
3-1- بررسی اثر آنتی اکسیدانی salen. 59
3-2بررسی اثرات سیتوتوکسیسیتی و ضد تکثیری salen، VOS و 5BMVOS بر روی لاینهای سلولی LNCaP 60
3-2-1 بررسی کسر ماندگاری سلولها با استفاده از آزمون MTT. 60
3-2-1-1-نتایج حاصل از آزمون MTT توسط تاثیرVOS بر روی لاینهای سلولی LNCaP. 60
3-2-1-2مطالعات مورفولوژیکی سلولهای تیمار شده با VOS استفاده از تصویربرداری با میکروسکوپ اینورت 61
3-2-2- 1- نتایج حاصل از آزمون MTT توسط تاثیر Salen بر روی لاینهای سلولی LNCaP. 62
3-2-2- 2- مطالعات مورفولوژیکی سلولهای تیمار شده با Salen 63
3-2-3-1- نتایج حاصل از آزمون MTT توسط تاثیر 5BMVOS بر روی لاینهای سلولی LNCaP. 64
3-2-3-2- مطالعات مورفولوژیکی سلولهای تیمار شده با 5BMVOS. 65
3-3- نتایج حاصل از استخراج و بارگذاری RNA بر روی ژل آگارز 66
3-4- نتایج حاصل از Real Time PCR.. 68
3-4-1بررسی منحنی ذوب مربوط به ژن GAPDH به عنوان ژن خانهدار، کاسپاز3 ، bax و bak قبل و بعد از تیمار 68
3-4-2- منحنی استاندارد ژن GAPDH ، کاسپاز3 ، bax و bak قبل و بعد از تیمار: 70
3-4-3- منحنی تکثیر ژنها 71
3-4-3منحنی تکثیر ژنهای ژنGAPDH ،کاسپاز 3 ، bax و bak در دستگاه Real Time PCR از تیمار با VOS 71
3-4-4منحنی تکثیر ژنهای ژنGAPDH ،کاسپاز 3 ، bax و bak در دستگاه Real Time PCR قبل و بعد از تیمار با 5BMVOS. 72
3-4-5- نتایج حاصل از آنالیز دادهها با استفاده از روش2-ΔΔCt 74
3-5- نتایج حاصل از بارگذاری PCR بر روی ژل آگارز 2 درصد. 75
3-5-1-نمونههای تیمار شده با VOS. 75
3-5-2-نمونههای تیمار شده با 5BMVOS. 75
3-6- اثر مهاری DMSO , Salen و VOS بر روی آنزیم Taq DNA پلیمراز 76
فصل 4 : بحث و نتیجهگیری
4- بحث.. ……….........78
منابع………….……………………………………………………………..83