بررسی اثر عصاره برگ زیتون و ترکیب اصلی آن(اولئوروپئین) بر سمیت سلولی ناشی از 6-هیدروکسی دوپامین در سلول های PC12

بررسی اثر عصاره برگ زیتون و ترکیب اصلی آن(اولئوروپئین) بر سمیت سلولی ناشی از 6-هیدروکسی دوپامین در سلول های PC12

بیماری پارکینسون یک اختلال تخریب کننده نورونی شدید و پیش رونده سیستم عصبی مرکزی است که یکی از شایع ترین اختلالات حرکتی می­باشد. برای اکثر بیماری‌های تخریب کننده عصبی اقدامات موجود حکم مسکن را دارند. به علت اینکه شواهد متعددی پیشنهاد می­کنندکه دربسیاری از بیماری‌های تخریب کننده نورونی مرگ سلولی غیر عادی رخ می­دهد، داروهایی که بتوانند مرگ سلولی را متوقف کنند ممکن است از تخریب نورونی بیشتر جلوگیری کرده و پیشرفت بیماری را آهسته کنند. ترکیبات عمده عصاره برگ زیتون فنول هایی مانند اولئوروپئین می­باشند، که آثار ضد آپوپتوزی از خود نشان می­دهند بنابراین، مطالعه حاضر جهت بررسی اثر عصاره برگ زیتون و اولئوروپئین بر سمیت سلولی ناشی از 6-هیدروکسی دوپامین بر روی سلول‌های PC12 به عنوان مدل in vitro بیماری پارکینسون طراحی شد. جهت القاء سمیت سلولی، سلول‌های PC12 با 150 میکرومول 6-هیدروکسی دوپامین تیمار شدند. در گروه­های درمانی دوزهای متفاوت برگ زیتون(g/mlμ600-100) واولئوروپئین(g/mlμ25-5) جهت بررسی اثر احتمالی محافظت کننده آنهااستفاده شد. سمیت سلولی توسط تست MTT تعیین شد. میزان ROS داخل سلولی توسط پروب فلورسنس دی­کلرو فلورسین دی استات از طریق روش فلوریمتری ارزیابی شد. قطعات DNA وپارامترهای بیوشیمیایی آپوپتوز (Bax, Bcl2 و caspase3) به ترتیب توسط الکتروفورز در ژل آگارز و ایمونوبلاتینگ ارزیابی شدند. نتایج ما نشان دادند که افزایش 6-هیدروکسی دوپامین منجر به افزایش میزان آسیب سلولی، تولید ROS داخل سلولی، فعال شدن کاسپاز3، قطعه­قطعه شدن DNA و همچنین افزایش نسبت Bax/Bcl2 می­گردد. تیمار با عصاره برگ زیتون(μg/ml 400و600) و اولئوروپئین ( μg/ml20و25) اختلالات ذکر شده را کاهش می­دهد. روی هم رفته نتایج پیشنهاد می­کنند که عصاره برگ زیتون و اولئوروپئین در برابر آپوپتوز القاء شده در اثر 6-هیدروکسی دوپامین اثر محافظت کننده نورونی دارند. حداقل بخشی از این اثر محافظت کننده به واسطه کاهش آپوپتوز نورونی اعمال می­گردد و پیشنهاد کننده پتانسیل دارویی عصاره برگ زیتون و اولئوروپئین برای کاهش تخریب عصبی سلول­های دوپامینرژیک می‌باشد.

کلمات کلیدی:عصاره برگ زیتون، 6-هیدروکسی دوپامین، آپوپتوز، سلول­هایPC12، اولئوروپئین.

فهرست مطالب:

فصل اول... 1

1-1 معرفی بیماری پارکینسون. 2

1-2 فاکتورهای دخیل در بیماری پارکینسون. 4

1-2-1 افزایش سن.. 4

1-2-2 فاکتور های محیطی.. 4

1-3 سیستم یوبی کوئیتین پروتئوزوم 16

1-3-1 فاکتورهای ژنتیکی دخیل دربیماری پارکینسون. 17

1-4 التهاب عصبی و بیماری پارکینسون. 21

1-4-1 نقش فعال شدن گلیال ها در بیماری پارکینسون. 22

1-4-2 تغییرات ریز محیط ها در بیماری پارکینسون. 23

1-5 معرفی گیاه زیتون. 23

1-5-1 خصوصیات شیمیایی عصاره برگ زیتون. 24

1-6 اولئوروپئین به عنوان ترکیب اصلی برگ زیتون. 28

فصل دوم.. 30

2-1 مواد و روشها 31

2-1-1 وسایل مورد استفاده. 31

2-1-2 مواد و داروهای مورد استفاده. 31

2-1-3 بافرها و محلولهای مورد استفاده. 32

2-2 جمع آوری برگ زیتون. 34

2-3 تهیه عصاره برگ زیتون. 34

2-4 کشت سلول. 35

2-5 سنجش بقای سلولی. 35

2-5-1 MTT assay 35

2-6 سنجش ROS داخل سلولی. 37

2-6-1 گروه‌های مورد استفاده در تست ROS. 38

2-7 استخراج DNA از سلول‌های PC12 39

2-7-1 گروه‌های مورد آزمایش جهت استخراج DNA 40

2-8 الکتروفورز قطعات DNA.. 41

2-8-1 گروه‌های مورد آزمایش در وسترن بلات... 41

2-8-2 استخراج پروتئین از سلول‌های PC12 42

2-8-3 اندازه گیری کل پروتئین.. 43

2-8-4 بررسی میزان پروتئینهای درگیر در آپوپتوز (Bax, Bcl-2, Caspase 3) با استفاده از روش وسترن بلات 44

2-8-5 الکتروفورز پروتئینها روی ژل SDS-PAGE.. 44

2-8-6 انتقال از ژل به کاغذ PVDF. 45

2-8-7 بلاکینگ 46

2-8-8 مرحله شستشو. 46

2-8-9 اضافه کردن آنتی بادی اولیه. 47

2-8-10 اضافه کردن آنتی بادی ثانویه. 47

2-8-11 افزودن سوبسترا و ثبت باندهای نورانی روی فیلم رادیولوژی.. 47

2-8-12 ظهور فیلم.. 48

2-8-13 زدودن آنتی بادیهای متصل به آنتی ژن از روی کاغذ و کنترل لودینگ نمونه ها 48

2-8-14 آنالیز تصاویر گرفته شده از باندهای پروتئینی.. 49

2-9 آنالیز آماری. 49

فصل سوم.. 50

3-1 نتایج. 51

3-1-1 بررسی تأثیرات غلظتهای متفاوت 6-هیدروکسی دوپامین بر بقای سلول‌های PC12. 51

3-1-2 بررسی اثرات دوزهای متفاوت عصاره بر سلول‌های PC12 52

3-1-3 بررسی اثرات دوزهای متفاوت اولئوروپئین بر سلول‌های PC12 53

3-1-4 بررسی اثرات دوزهای متفاوت عصاره برگ زیتون(OLE) بر بقای سلول‌های PC12کشت شده در حضور 6-هیدروکسی دوپامین.. 54

3-1-5 بررسی اثرات دوزهای متفاوت اولئوروپئین بر بقای سلول‌های PC12کشت شده در حضور 6-هیدروکسی دوپامین 55

3-1-6 بررسی اثرات دوزهای موثر عصاره برگ زیتون بر میزان تولید ROS داخل سلولی ناشی از 6-هیدروکسی دوپامین 56

3-1-7 بررسی اثرات دوزهای موثر اولئوروپئین بر میزان تولید ROS داخل سلولی ناشی از 6-هیدروکسی دوپامین 57

3-1-8 آنالیز نتایج به دست آمده از وسترن بلات برای پروتئینهای درگیر در آپوپتوز سلولی.. 58

3-1-9 بررسی اثرات عصاره برگ زیتون واولئوروپئین بر قطعه قطعه شدن DNA ناشی از 6-هیدروکسی دوپامین 63

فصل چهارم.. 64

4-1 بحث و نتیجه گیری. 65

4-2 بروز استرس اکسیدایتو وآپوپتوز در بیماری پارکینسون. 65

4-3 عملکرد کانال های کلسیم و بیماری پارکینسون. 72

4-4 بروز التهاب نورونی در بیماری پارکینسون. 73

4-5 نتیجه گیری کلی. 76

4-6 پیشنهادها 77

فهرست اشکال:

شکل 1- 1:تولید گونه های واکنش پذیر اکسیژن د راثر پارکوات 8

شکل 1- 2: مکانسیم القاء سمیت عصبی توسط 6-هیدروکسی دوپامین.. 13

شکل 3- 1:بررسی اثر غلظت‌های متفاوت 6-هیدروکسی دوپامین بر بقای سلول‌های PC12 با استفاده از تست MTT 51

شکل 3- 2: بررسی اثر غلظت‌های متفاوت عصاره برگ زیتون بر بقای سلول‌های PC12 با استفاده از تست MTT 52

شکل 3- 3: بررسی اثر غلظت‌های متفاوت اولئوروپئین بر بقای سلول‌های PC12 با استفاده از تست MTT 53

شکل 3- 4: بررسی اثر غلظت‌های متفاوت عصاره برگ زیتون بر بقای سلول‌های PC12 در حضور 6-هیدروکسی دوپامین با استفاده از تست MTT. 54

شکل 3- 5: بررسی اثر غلظت‌های متفاوت اولئوروپئین بر بقای سلول‌های PC12 در حضور 6-هیدروکسی دوپامین با استفاده از تست MTT. 55

شکل 3- 6: بررسی اثر غلظت‌های متفاوت عصاره برگ زیتون بر میزان ROS تولید شده در حضور 6-هیدروکسی دوپامین 56

شکل 3- 7: بررسی اثر غلظت‌های متفاوت اولئوروپئین بر میزان ROS تولید شده در حضور 6-هیدروکسی دوپامین 57

شکل 3- 8: بررسی بیان کاسپاز 3 فعال شده در گروه‌های تیمار شده با 6-هیدروکسی دوپامین و عصاره برگ زیتون 59

شکل 3- 9: بررسی بیان کاسپاز 3 فعال شده در گروه‌های تیمار شده با 6-هیدروکسی دوپامین و اولئوروپئین 60

شکل3- 10: بررسی بیان نسبت Bax/Bcl-2 در گروه‌های تیمار شده با 6-هیدروکسی دوپامین و عصاره برگ زیتون 61

شکل3- 11: بررسی نسبت Bax/Bcl-2 در گروه‌های تیمار شده با 6-هیدروکسی دوپامین و اولئوروپئین 62

شکل3- 12:بررسی قطعه قطعه شدن DNA در حالت تیمار با 6-هیدروکسی دوپامین همراه با دوزهای موثر اولئوروپئین و عصاره برگ زیتون. 63

خرید فایل

پاورپوینت طرح توجیهی زیتون

پاورپوینت طرح توجیهی زیتون

•خلاصه طرح :

•موضوع طرح : احداث باغ زیتون ( مساحت 50 هکتار )

•ظرفیت اسمی تولید : 50 هکتار

•نوع تولید : زیتون

•تعداد شاغلین : 9 نفر

•مشخصات سرمایه گذاری طرح :

•سرمایه گذاری کل : 2992830 هزار ریال

•سهم شخص : 897849 هزار ریال

•سهم بانک : 2094981 هزار ریال

•سرمایه ثابت : 2944700هزار ریال

•سرمایه در گردش : 48130 هزار ریال

•درآمد سالیانه : 2040000 هزار ریال

•( براساس متوسط درآمد فروش 10 ساله )

•درآمد سالیانه : 2550000 هزار ریال

•خصوصیات گیاه شناسی : •

از تیره زیتونیان

همیشه سبز

مقاوم

دائم العمر

•( براساس حداکثر تولید )

اقلیم

ü مدیترانه ای و یا شبیه مدیترانه ای üزمستان های نسبتا سرد ومرطوب – تابستان های گرم وخشک üگیاهان کوچک دمایی در حدود 9 - درجه تا 10-درجه و گیاهان بزرگتر دمایی در حدود
12- تا 15 - درجه را تحمل می کنند . üنیازآبی این گیاه حدود 500 تا 800 بارندگی نیاز دارد

نیازهای کودی گیاه :

üکودهای ازته وکودهای دامی و تاثیرات آن

خصوصیات برداشت ( انواع برداشت ) :

ü برای کنسرو کردن üبرای تولید روغن زیتون

شرایط تولید محصول:

üسرمایه گذاری قبل از شروع بهره برداری .

پیش نمایش فایل

خرید فایل

پاورپوینت تجزیه تحلیل ویلای مدرن آنا و سعید در دهکده ی زیتون اصفهان

پاورپوینت تجزیه تحلیل ویلای مدرن آنا و سعید در دهکده ی زیتون اصفهان

مشخصات عمومی پروژه ویلای آنا و سعید

نام پروژه: ویلای آنا و سعید

موقعیت: ایران،اصفهان، مرق، دهکده زیتون

شرکت مشاوره: دفتر فرایند منطقی در طراحی معماری

معماران مسئول: احسان حسینی، الهام گرامیزاده نائینی

تیم طراحی: مرجان صادقیان

تاریخ شروع و اتمام اجرا: ۹۳

مساحت زمین: ۱۰۰۰ متر مربع

مساحت ساخته شده: ۴۲۰ متر مربع

نوع ساختمان: مسکونی

مشاوره سازه: هوشنگ اشرفی

مهندس تاسیسات مکانیکی و الکتریکی: حسینی، شاهنظری

مدیر اجرا: عباس جبیری

پرزانته: نیلوفر موسوی، حسین حسینی، حمیدرضا گوگردچیان

عکاس: پرهام تقی اف، فرشید نصرآبادی

کارفرما: سعید صادقیان، آنا قدسی

جوایز: رتبه دوم جایزه معمار در بخش ساختمان های مسکونی تک واحدی، سال ۱۳۹۴

داشتن ویلایی در دل شهر تاریخی اصفهان در دهکده ای زیبا با بافتی متراکم، از آن ویلاهای مدرن و متفاوت آدم را به سمت چالشی می برد که بنایی داشته باشد متمایز، مدرن و در عین حال مناسب فرهنگ و معماری غنی شهر اصفهان... چالشی که احسان حسینی، الهام گرامیزاده نائینی از دفتر فرایند منطقی در طراحی معماری از آن سربلند بیرون آمدند و رتبه دوم جایزه معمار در بخش ساختمان های مسکونی تک واحدی، سال ۱۳۹۴، را از آن خود کردند.

خرید فایل

دانلود پروژه مروری بر پژوهش های انجام شده در مورد بیماری های زیتون در ایران

مروری بر پژوهش های انجام شده در مورد بیماری های زیتون در ایران

این محصول در قالب فایل word و در 90 صفحه تهیه و تنظیم شده است.

توجه :

شما می توانید با خرید این محصول فایل " قلق های پایان نامه نویسی (از عنوان تا دفاع)" را به عنوان هدیه دریافت نمایید.

فهرست

عنوان صفحه

چکیده..................................................................................................................... 1

مقدمه..................................................................................................................... 3

روش تحقیق و بررسی.......................................................................................... 9

بیماریهای مهم درختان زیتون وبررسیهای انجام شده روی آن در چنداستان.... 13

پژمردگی ورتیسلیومی........................................................................................... 13

بیماری لکه طاووسی زیتون.................................................................................. 21

سرخشکیدگی شاخه های جوان............................................................................ 26

بیماری فوماژین یا کپک دوده ای.......................................................................... 27

بیماری مومی شدن میوه....................................................................................... 28

پوسیدگی ریشه و طوقه......................................................................................... 29

ماکروفومای زیتون............................................................................................... 30

آنتراکنوز زیتون.................................................................................................... 32

پوسیدگی بذر و هسته........................................................................................... 33

بیماری فومای زیتون............................................................................................. 33

بیماری سرخشکیدگی سرشاخه ها........................................................................ 34

بیماری لکه برگی زیتون........................................................................................ 34

خشکیدگی نوک سرشاخه ها................................................................................. 34

سل زیتون.............................................................................................................. 34

نماتد مولد غدة ریشه............................................................................................. 38

گلسنگ زیتون........................................................................................................ 44

انگل گلدار سس..................................................................................................... 44

سرما و یخبندان..................................................................................................... 45

آفتاب سوختگی...................................................................................................... 46

سایر عوارض جوی............................................................................................... 47

عدم باردهی........................................................................................................... 48

ریزش گل و میوه.................................................................................................. 49

سال آوری............................................................................................................. 51

سترونی................................................................................................................. 52

خفقان ریشه........................................................................................................... 53

کلروز..................................................................................................................... 54

بررسی های انجام شده در استان های مختلف.................................................... 55

جمع بندی و بحث.................................................................................................. 62

روش های حفاظت................................................................................................. 66

جداول پیوست....................................................................................................... 74

خرید فایل

دانلود طرح توجیهی احداث باغ زیتون (به مساحت 50 هکتار)

            در 17 صفحه دانلود طرح توجیهی احداث باغ زیتون خلاصه طرح: موضوع طرح: دستگاه صادره کننده مجوز: وزارت جهاد کشاورزی ظرفیت اسمی تولیدات: 50 هکتار نوع تولیدات: زیتون تعداد شاغلین: 9 نفر 2992 میلیون ریال / سرمایه گذاری کل طرح: 83 2944 میلیون ریال / سرمایه گذاری ثابت: 70 48 میلیون ریال / سرمایه در گردش: 13 2040 میلیون ریال / درآمد سالیانه: 00 2550 میلیون ریال / درآمد سالیانه: 00 949 میلیون ریال / سود ویژه: 31 1449 میلیون ریال / سود ویژه: 11 3 سال (براساس متوسط درآمد فروش 10 ساله) / دوره بازگشت سرمایه: 1 32 درصد (براساس متوسط درآمد فروش 10 ساله) / نرخ بازدهی سرمایه: % 4 مقدمه زیتون از شاخه گیاهان گلدار، از گیاهان جدا گلبرگ و از تیره زیتونیان است. زیتون گیاهی است همیشه سبز با عمر زیاد که می توان به مفهومی آن را درخت ابدی دانست و در صورتی که تنه اصلی این درخت ...

دانلودمقاله ماندگاری و بقای میکروارگانیزم ها در روغن زیتون تصفیه نشده

          مقدمه:روغن زیتون از خرد شدن کامل میوه در طی فرآیندهای جداسازی متوالی از بخش روغنی آن طی عمل سانتریفوژ بدست می آید. روغن زیتون تصفیه‌نشده (virgin) تازه دارای مواد جامد معلق ومقداری ازشیره گیاهی است که میزان آن براساس گونه های مختلف و میزان تکامل و رسیده بودن میوه و روش‌های فرآوری روغن متفاوت است. با این وجود، کیفیت روغن زیتون در حین نگهداری بهبود می‌یابد. وقتی مواد جامعد معلق موجود در روغن رسوب می‌کنند روغن شفافیت بهتری یافته و لذا طعم جدیدی می‌گیرد. در همین زمان، فرآیندهای تجزیه کنندگی که در تشکیل ترکیبات فنولی دخیل می باشند، روی می دهند. در حقیقت، ،طعم تلخ روغن زیتون جدیداً تولید شده طی زمان نگهداری از بین می رود زیرا گلوکوسیدی تحت عنوان oleuropein تبدیل به ترکیبات ساده تری می شود که دیگر تلخ نیستند.تاکنون اکثر تحقیقات انجام ش ...

دانلود مقاله زیتون

  تاریخچهزیتون را اگر نتوان قدیمی‌ترین گیاهی دانست که در جهان مورد بهره‌برداری قرار گرفته، بدون تردید باید آن را یکی از قدیمی‌ترین گیاهان منطقه‌ی مدیترانه و به ویژه خاورمیانه دانست، به دلیل اینکه رویشگاه و گسترشگاه طبیعی این درخت خاورمیانه و حوزه‌ی مدیترانه بوده است. قدمت زیتون موجب گشته تا این درخت با تاریخ نوع بشر درهم آمیزد. پژوهندگان اظهار کرده‌اند که آشنایی با زیتون و بهره‌برداری از آن در خاورمیانه و منطقه‌ی مدیترانه با پیدایش اولین انسان‌های متمدن به ویژه در شرق مدیترانه (بین‌النهرین، سوریه، لبنان، یونان، قبرس، اردن و ...) همزمان بوده است و به بیش از 6000 سال می‌رسد. رومیان از این درخت حمایت کرده و آن را مایه صلح و صفا معرفی می‌کردند و این باور هنوز بطور سمبولیک در فرهنگ غرب وجود دارد، بطوری که نشان سازمان ملل را شاخه& ...

پاورپوینت تحلیل شهرک مسکونی زیتون در اصفهان

پاورپوینت تحلیل شهرک مسکونی زیتون در اصفهان ............................ برای خرید این محصول به پایین مراجعه کنید. ............................ "> ............................ دسته بندی : مطالعات ............................ شامل : موضوع : پاورپوینت تحلیل شهرک مسکونی زیتون در اصفهان تعداد صفحات (پاور) : 23 حجم فایل اصلی : 4.12 mb ........................... عکسی از فایل موجود عکس را در سیستم خود ذخیره کنید تا با کیفیت اصلی مشاهده نمایید. ...

دانلود مقاله ارزش غذایی زیتون

هر 100 گرم قسمت خوراکی میوه ی زیتون به ‌طور متوسط مواد مغذی زیر را دارد : آب 60 گرم، چربی 20گرم، مواد قندی 100 گرم، پروتئین 1 گرم، املاح (کلسیم، فسفر، پتاسیم، گوگرد، مس، منگنز) 3/0 گرم و ویتامین‌های متعدد از جمله D, A و E. از نکات قابل توجه در ترکیبات زیتون مقدار کلسیم موجود در آن است که این میزان، بیش از کلسیم موجود در شیر گاو (122میلی گرم) می‌ باشد . به طور کلی 100 گرم قسمت خوراکی میوه ی زیتون حاوی 224 کیلو کالری انرژی است . تهیه روغن زیتون روغن زیتون مایعی شفاف ، کمی سبز رنگ یا زرد طلایی است که در 15 درجه ی سانتی ‌گراد، کاملاً شفاف و در 10 درجه ی سانتی ‌گراد کدر می‌ شود. در صفر درجه دانه دانه و در 20- درجه ی سانتی گراد کاملاً سفت می شود . خمیر زیتون از میوه ی زیتون پس از عملیات تمیز کردن تهیه می ‌شود. سپس این خمیر، تحت عملیات روغن‌ کشی قرار ...

620 - دانلود طرح توجیهی: احداث باغ زیتون به مساحت 200 هکتار - 17 صفحه

                  دانلود طرح توجیهی و مطالعات امکان سنجی طرح بررسی ابعاد مختلف طرح (معرفی محصول - مالی – منابع انسانی – فضا و ...) دارای فرمت PDF می باشد. مناسب برای شروع یک کسب و کار مناسب جهت ارائه به دانشگاه به عنوان پروژه درسی نگارش طرح توجیهی یک طرح کسب و کار خوب باید مانند یک داستان، گویا و واضح باشد و باید اهداف کسب و کار را به صورت موجز و کامل بیان کرده و راه رسیدن به آنها را نیز مشخص نماید. به‌گونه‌ای که سرمایه‌گذاران (دست‌اندرکاران کسب و کار) دقیقاً مفهوم را متوجه شده و خودشان نیز راغب به خواندن و درک دیگر بخش‌ها گردند . طرح توجیهی در واقع سندی آماده ارائه می باشد که در آن نحوه برآورد سود و زیان و سرمایه ثابت، سرمایه در گردش و نقطه سر به سر، بازدهی سرمایه، دوره برگشت سرمایه و ... بیان خو ...