بررسی میزان تاثیر روش های صحیح مطالعه دروس،بر پیشرفت تحصیلی دانش آموزان دوره راهنمایی دخترانه آموزش و پرورش

این پژوهش برای آگاهی از تأثیر روشهای مختلف مطالعه درسها بر پیشرفت تحصیلی دانش آموزان و همچنین ارائه ی روشهای صحیح مطالعه برای آنان انجام پذیرفته است.

نمونه ها از بین دانش آموزان دختر راهنمایی انتخاب شده است .

در این پژوهش از روش آماری تحلیل واریانس استفاده شده است.

فهرست مطالب:

فصل اول:

1-1- مقدمه :11

2-1- بیان مسئله و سؤال های تحقیق :12

3-1- اهداف پژوهش :12

4-1- اهمیت و ضرورت پژوهش :13

5-1- فرضیه :14

6-1- تعاریف عملیاتی :14

7-1- تعاریف اصطلاحات و واژه ها :15

فصل دوم:

1-2- ادبیات تحقیق.. 17

2-2- پیشینه ی تحقیق :52

فصل سوم:

روش پژوهش.... 57

1-3- جامعه ی آماری.. 57

2-3- گروه نمونه آماری :57

3-3- روش نمونه گیری :57

4-3- نوع تحقیق :58

5-3- طرح تحقیق :59

6-3- روش جمع آوری داده ها (روش آماری) :59

فصل چهارم:

تجزیه و تحلیل داده ها60

1-4- مقدمه :61

2-4- استخراج داده ها61

3-4- تشکیل جداول اجرای آزمون آماری.. 63

4-4- تفسیر نتیجه آزمون :67

فصل پنجم:

1-5- مقدمه :83

2-5- خلاصه ی تحقیق :83

3-5- خلاصه ی نتایج :84

4-5- محدودیتها :85

5-5- پیشنهادها :86

فهرست منابع و مآخذ. 87

پیوست ها89

پرسشنامه :89

خرید فایل

مطالعه رابطه سازوکارهای کاربردی دیوان محاسبات کشور با پاسخگویی مسئولین دستگاههای اجرایی

شرح مختصر:

پاسخگویی بعد جدانشدنی حاکمیت و مدیریت دولتی است. دولت ها برای ارتقای بهره­ وری و کارایی خود همواره تحت فشار بوده ­اند. لیکن این­ روزها مردم در خصوص فعالیت­های حکومت­ها نسبت به قبل آگاه­تر شده ­اند و علاقه­مندند بدانند که منابع حکومت­ها چگونه به مصرف می­رسد. دولت­های اغلب کشورها، تلاش می­کنند که هنگام استفاده از منابع­شان پاسخگوتر باشند. بنابراین، با توجه به این معیار تحقیق حاضر به بررسی ارتباط بین سازوکارهای کاربردی دیوان محاسبات کشور با پاسخگویی مسئولین دستگاه­های اجرائی می­پردازد.

پژوهش حاضر از نظر هدف در حیطه پژوهش­های کاربردی بوده و بر اساس ماهیت و روش، یک پژوهش توصیفی-پیمایشی است. جامعه آماری این تحقیق، کلیه مسئولین دستگاه­های اجرایی استان قم که به نحوی از انحاء از بودجه کل کشور استفاده می­ نمایند، در نظر گرفته شده است که این افراد بالغ بر 92 نفر می باشند. روش نمونه­گیری مورد استفاده، روش نمونه­ گیری تصادفی ساده بوده که اندازه نمونه معادل 78 نفر تعیین شده است.

برای گردآوری اطلاعات از پرسشنامه استفاده شده و اعتبار محتوای آن توسط اساتید راهنما و مشاور و چند نفر از افراد مطلع و متخصص تأیید گردیده و پایایی بر اساس آلفای کرونباخ تأیید شده است.

با توجه به نتایج بدست آمده، در وضعیت موجود سه مؤلفه حسابرسی رعایت، حسابرسی مالی و نامه­ های مدیریت و واخواهی و در وضعیت مطلوب، تمام مؤلفه‌های سازوکارهای کاربردی به جزء صدور آراء از سوی هیأت­های مستشاری، با پاسخگویی مسئولین دستگاه‌های اجرایی ارتباط داشته است. در بین سازوکارهای کاربردی دیوان محاسبات کشور، حسابرسی جامع بالاترین رتبه را داشته و بیشترین ارتباط را با پاسخگویی مسئولین دستگاه‌های اجرایی دارد. کمترین ارتباط با پاسخگویی مسئولین، مربوط به مؤلفه ارسال گزارش تخلف به دادسرا می­باشد.

فهرست مطالب

چکیده

مقدمه

شرح و بیان مسئله

اهداف و فرضیات پژوهش

فرضیه اصلی

فرضیه های فرعی

روش شناسی پژوهش

روش پژوهش

قلمرو پژوهش

جامعه، جامعه هدف و نمونه

تجزیه و تحلیل داده ها

وضعیت موجود و مطلوب رابطه مؤلفه‌های تحقیق با پاسخگویی مسئولین دستگاه­های اجرایی

بررسی رابطه «سازوکارهای کاربردی دیوان محاسبات کشور» با پاسخگویی مسئولین دستگاه­های اجرایی در وضع موجود

بررسی رابطه مؤلفه «سازوکارهای کاربردی» با پاسخگویی مسئولین دستگاه­های اجرایی در وضع مطلوب

سایر نتایج

مقایسه وضعیت موجود و مطلوب «رابطه بین سازوکارهای کاربردی و پاسخگویی مسئولین دستگاه­های اجرایی»

مقایسه و رتبه‌بندی میزان ارتباط مؤلفه­های تحقیق

نتیجه ­گیری کلی

پیشنهادها

پیشنهادهایی برای پژوهش­های آتی

منابع و مأخذ

خرید فایل

مطالعه تطبیقی الگوهای نوین مدیریت منابع انسانی و ارائه الگوی مناسب برای ایران

شرح مختصر:

در راستای سیاستهای وزارت بهداشت ، درمان و آموزش پزشکی جمهوری اسلامی ایران،طرح تحقیقاتی (( مطالعه تطبیقی الگوهای نوین مدیریت منابع انسانی و ارائه الگوی مناسب برای ایران )) انجام پذیرفته و با یاری پروردگار متعال به مرحله نهایی رسیده است .

در انجام این طرح تحقیقاتی ، یک گروه پنج نفره متشکل از مدیر طرح ( آقای محمد رضا عاطفی ) ، یک کارشناس ارشد و سه کارشناس ، زمانی حدوداً سه ماهه را به تحقیق و مطالعه در زمینه سیستم های مدیریت منابع انسانی (HRM ) ، بررسی وضع موجود منابع انسانی در وزارت بهداشت و درمان و مدلهای نوین در این زمینه گذرانیده اند .

گروه مذکور ضمن استفاده از بسیاری منابع داخلی موجود در ایران ، به این منابع قناعت ننموده و با استفاده از شبکه جهانی اینترنت ده ها مقاله و گزارش چندین کنفرانس مربوط را در زمینه HRM مورد کنکاش و بررسی قرار داده است .

طرح تحقیقاتی مذکور ، در چهار مرحله به انجام رسیده ، که از قرار ذیل می باشد :

مرحله اول ) مطالعه قوانین اداری و استخدامی جمهوری اسلامی ایران و استخراج مواردی از این قوانین که مرتبط با مقوله مدیریت منابع انسانی و یا خطاب به وزارت بهداشت و درمان و کارکنان آن .

مرحله دوم ) استخراج کلیات و ادبیات مدیریت منابع انسانی با استفاده از منابع علمی داخلی و خارجی .

مرحله سوم ) بررسی موضوعی مدلهای نوین مدیریت منابع انسانی از طریق مقالات و تئوریهای روز جهان در اینترنت و مراجعه به کتابخانه های دانشگاهها و استفاده از متن سخنرانیها و پایان نامه ها .

مرحله چهارم ) ارائه پیشنهادات و الگوهای مناسب برای وزارت بهداشت ، درمان و آموزش پزشکی با در نظر گرفتن الگوهای نوین جهانی و نتایج حاصل از بررسی چالشهای موجود در این بخش .

v گروه مجری طرح ، سیستم مدیریت منابع انسانی را در زمینه های ذیل مورد بررسی قرار داده اند :

1. طراحی ساختار سازمانی
2. تامین نیروی انسانی
3. آموزش و بهسازی نیروی انسانی
4. مدیریت عملکرد
5. نظامهای پرداخت حقوق و دستمزد
6. حفظ و نگهداری منابع انسانی
7. جابجایی و ترک نیروی انسانی
8. روابط کار
9. سیستم های اطلاعاتی منابع انسانی

در این نوشتار کوتاه تنها به شمه ای از آنچه در موارد فوق به انجام رسانیده اشاره می گردد:

فهرست مطالب

طراحی ساختار سازمانی
تامین نیروی انسانی
آموزش و بهسازی نیروی انسانی
مدیریت عملکرد
نظامهای پرداخت حقوق و دستمزد
حفظ و نگهداری منابع انسانی
جابجایی و ترک نیروی انسانی
روابط کار
سیستم های اطلاعاتی منابع انسانی( HRIS )
اهمیت پژوهش
اهداف پژوهش
ادبیات موضوع
روش تحقیق
نتایج تحقیق
منابع و ماخذ

خرید فایل

مطالعه و بررسی دمیه القصر و عصره اهل العصر اثر باخزری شاعر ایرانی اشعار عربی

شرح مختصر:

مقدمه

بیان مسئله

این پایان نامه پژوهشی پیرامون یکی از آثار ادبی ارزشمند به نام « دمیه القصر و عصره اهل العصر » تألیف نام آور ایرانی در قرن پنجم هجری ابوالحسن باخرزی می باشد که در این پژوهش به ترجمه و شرح اشعار ده تن از شاعران ایرانی تازی گوی مندرج در آن پرداخته شد .

اهمیت تحقیق

این پایان نامه سعی دارد زوایای بیشتری ازخدمات ادبی باخزری را به نمایش بگذارد و جنبه های زیبایی ـ شناختی و محتوایی آن را با اشعار دیگر شاعران ایرانی و تازی گوی عرب مورد مقایسه قرار دهد و همچنین استعداد و مهارت ایرانیان در آفرینش آثار ارزشمند و برجسته ادبی به زبان عربی را به نمایش بگذارد .

فرضیه

استعداد ایرانیان و مهارت آنها در آفرینش آثار ادبی به زبان عربی.

محدودیت

به دلیل اینکه تا کنون به شرح و ترجمه اشعار کتاب دمیه القصر پرداخته نشده و تنها به وسیله محققی به نام تونجی گردآوری شده بود از جهت دستیابی به منابع و مآخذ در شرح و ترجمه اشعار محدودیت های فراوانی وجود داشت .

پیشینه تحقیق

تا آنجایی که قبل از نگارش پایان نامه مطالعه نموده ام تا کنون کسی چه به عنوان کتاب و چه به عنوان پایان نامه به ترجمه و شرح اشعار آن نپرداخته است.

فصل اول: زندگی نامهٌ مولف علی بن الحسن الباخرزی

1-1 باخرز

پیش از پرداختن به زندگی نامة باخرزی بهتر است که گزارش کوتاهی دربارة باخرز آورده شود. باخرز یکی از توابع نیشابور در خراسان بوده است. این منطقه پس از استیلای مغولان بر خراسان، آسیب چندانی ندیده است و در سدة هشتم قمری باخرز ولایتی معتبر و آباد بوده و محصولات کشاورزی آن به دیگر نقاط صادر می شد.

1-2 نام، کنیه و لقب او

او نورالدین ابوالحسن علی بن الحسن بن ابوطیب باخرزی است و منسوب به شهر خود «باخرز» می باشد که در آن متولد گردیده، رشد پیدا کرده و بخشی از علوم را در آن فرا گرفته است.

1-3 پدر او و مقام و منزلت وی

باخرزی در خانواده ای مرفه متولد شد کتابهایی که دربارة باخرزی سخن گفته اند همگی به اتفاق می گویند که پدرش شیخ ابوعلی حسن بن ابوطیب می باشد تنها یکی از شاعران به نام ابو علی الحسن عبد الله العثمانی، او را در یکی از اشعار خود، با کنیة ابواحمد خوانده است.

1-4 دانش و اخبار او

1-5 مقام و ادبیات او

1-6 چگونگی قتل او

1-7 رشد علمی و استادان او

1-8 گشت و گذار علمی او

1-9 نشانه های فرهنگی او

1-10 منابع باخرزی

1-11 کشورها در کتاب دمیه

1-12 نظام الملک و دمیه

1-13 آثار باخرزی

1-14 تحلیلی بر اثر باخرزی

فصل دوم: الوزیرُ الصفیُّ أبوالعلاءِ محمدُ بنُ علیِّ بنِ حسولِ (؟-450هـ ) و اشعار وی

زندگی نامه

ترجمۀ متن و شرح آن

فصل سوم: ابوعلی حمدُ بنُ محمد بنِ فُورَّجه البروجردیُّ و اشعار وی

زندگی نامه

ترجمۀ متن و شرح آن

فصل چهارم: ابوالمحاسن اسماعیلُ بنُ حَیدرالعَلَویّ(؟- 434 هـ)و اشعار وی

زندگی نامه

ترجمه متن وشرح آن

فصل پنجم: ابــــوالفــــوائــــد و اشعار وی

زندگی نامه

ترجمه متن و شرح آن

فصل ششم: محمدُبنُ الحسنِ بنِ مزروقٍ الأصبهانی (؟-421هـ) واشعار وی

زندگی نامه

ترجمه متن وشرح آن

فصل هفتم: طاهرُبنُ محمدبنِ أحمدَ بنِ مرزوقٍ الأصفهانیُّ و اشعار وی

زندگی نامه

ترجمه و متن و شرح آن

فصل هشتم: ابوالقاسم ابنَ أبی العلاءِالأَصفَهانیُّ و اشعار وی

زندگی نامه

ترجمۀ متن وشرح آن

فصل نهم: ابن البدیع الأصفهانِیُّ و اشعار وی

زندگی نامه

ترجمه و شرح متن

فصل دهم: ابوالمُطّهر الأصفهانیُّ واشعار وی

زندگی نامه

ترجمه متن و شرح آن

فصل یازدهم: (الاُستادُ الرئیسُ) ابونصرِ و اشعار وی

زندگی نامه

ترجمه متن و شرح آن

منابع

خرید فایل

روش تحقیق میزان علاقه به مطالعه 1

روش تحقیق میزان علاقه به مطالعه 1

فهرست

فصل اول

کلیات
مقدمه
بیان مسئله
ضرورت و اهمیت تحقیق
اهداف تحقیق
سؤالات تحقیق
تعاریف عملیاتی واژه ها
خلاصه فصل
فصل دوم
پیشینه تحقیق
مقدمه
کودک، کتاب، مطالعه
تدارک محیط مناسب برای مطالعه
اصول مطالعه و تحقیق و فراگیری بهتر آن
اصول قبل از شروع مطالعه و تحقیق
روشهای مطالعه
فنون خواندن اجمالی
روش سریع خواندن
روش خواندن تجسمی
روش خواندن انتقادی
روش خواندن عبارت تکراری
روش دقیق خواندن
خواندن به عنوان یادگیری
فعالیت و خواندن
خواندن فعال
زمان خواندن و تحقیق
اهداف خواندن
خلاصه فصل دوم
فصل سوم
روش اجرایی تحقیق
مقدمه
روش تحقیق
جامعه آماری
نمونه آماری
ابزار تحقیق
روشهای آماری
متغیرها
توضیح روشهای آماری
فصل چهارم
تجزیه و تحلیل آماری
فصل پنجم
مقدمه
خلاصه پژوهش
نتیجه گیری
محدودیتها
پیوست
فهرست منابع
پرسشنامه

خرید فایل

روش تحقیق ایجاد علاقه به مطالعه

روش تحقیق ایجاد علاقه به مطالعه

فهرست

عنوان	صفحه
فصل اول	1
کلیات	1
مقدمه	1
بیان مسئله	2
ضرورت و اهمیت تحقیق	3
اهداف تحقیق	4
سؤالات تحقیق	5
تعاریف عملیاتی واژه ها	6
خلاصه فصل	7
فصل دوم	8
پیشینه تحقیق	8
مقدمه	9
کودک، کتاب، مطالعه	12
تدارک محیط مناسب برای مطالعه	14
اصول مطالعه و تحقیق و فراگیری بهتر آن	15
اصول قبل از شروع مطالعه و تحقیق	15
روشهای مطالعه	17
فنون خواندن اجمالی	17
روش سریع خواندن	18

خرید فایل

برسی راههای مؤثر بر میزان افزایش رغبت و علاقه جهت مطالعه و تحقیق در دانشجویان دانشگاه

برسی راههای مؤثر بر میزان افزایش رغبت و علاقه جهت مطالعه و تحقیق در دانشجویان دانشگاه

کلیات
مقدمه
بیان مسئله
ضرورت و اهمیت تحقیق
اهداف تحقیق
سؤالات تحقیق
تعاریف عملیاتی واژه ها
خلاصه فصل
فصل دوم
پیشینه تحقیق
مقدمه
کودک، کتاب، مطالعه
تدارک محیط مناسب برای مطالعه
اصول مطالعه و تحقیق و فراگیری بهتر آن
اصول قبل از شروع مطالعه و تحقیق
روشهای مطالعه
فنون خواندن اجمالی
روش سریع خواندن
روش خواندن تجسمی
روش خواندن انتقادی
روش خواندن عبارت تکراری
روش دقیق خواندن
خواندن به عنوان یادگیری
فعالیت و خواندن
خواندن فعال
زمان خواندن و تحقیق
اهداف خواندن
خلاصه فصل دوم
فصل سوم
روش اجرایی تحقیق
مقدمه
روش تحقیق
جامعه آماری
نمونه آماری
ابزار تحقیق
روشهای آماری
متغیرها
توضیح روشهای آماری
فصل چهارم
تجزیه و تحلیل آماری
فصل پنجم
مقدمه
خلاصه پژوهش
نتیجه گیری
محدودیتها
پیوست
فهرست منابع
پرسشنامه

خرید فایل

پاورپوینت مطالعه فرودگاه

پاورپوینت مطالعه فرودگاه

فایل پاورپوینت مطالعه طرح فرودگاه ، در حجم 31 اسلاید قابل ویرایش.

بخشی از متن:
فرودگاه به محدوده ای مکانی – فضایی اتلاق می شود که برای کنترل ارتباط هوایی بین نقاط مختلف بکار می رود.
انواع فرودگاه عبارتند از:
1 فرودگاههای کشوری که برای فعالیتهای ترابری، کارهای هوایی و هواپیمایی توریستی داخلی و بین المللی مورد استفاده قرار میگیرند .

2فرودگاههای نظامی یا پایگاههای هوایی که درآن به غیر از هواپیماها، واحد‌های دیگر نیروی هوایی ، هوا نیروز یا هوا دریا مستقرند .

3 فرودگاههای فنی که معمولا در جوار کارخانه‌های تولید هواپیما بر پا می شوند و هواپیماهای نمونه در آن به آزمایشهای خود در زمین یا در حال پرواز می پردازند

فهرست مطالب :
مقدمه
تعریف فرودگاه
انواع فرودگاه
بخش های اصلی فرودگاه
ساختمان های جانبی فرودگاه
شناخت کلی بخش های مختلف فرودگاه
تقسیمات اولیه انواع مسافر در فرودگاه
گونه شناسی فرودگاه
انواع سیستم های پارک هواپیما نسبت به ساختمان پایانه
گونه های مختلف انتقال مسافران به هواپیما
گونه های آرایش توقف هواپیما
نمونه‌هایی از فرودگاههای موجود
روند طراحی
پلان ها
منابع

این فایل با فرمت پاورپوینت در31اسلاید قابل ویرایش تهیه شده است.

خرید فایل

مطالعه ظرفیت خازن و تاثیر ضریب دی‌الکتریک در آن

مطالعه ظرفیت خازن و تاثیر ضریب دی‌الکتریک در آن

بررسی ظرفیت خازن و اندازه‌گیری ضریب دی‌الکتریک هوا و چند نمونه‌ی دیگر

منظور آزمایش:

بررسی عوامل موثر در ظرفیت خازنهای تخت و اندازه‌گیری ضریب دی‌الکتریک هوا و چند نمونه‌ی دیگر مانند: شیشه، فیبر.

کف‌پوش و .‌..

وسایل مورد نیاز:

1ـ خازن تخت با فاصله‌ی قابل تنظیم

2ـ ولت‌سنج

3ـ آمپرسنج

4ـ دستگاه نوسان‌ساز

5ـ ورقه شیشه‌ای (35×30)

6ـ ورقه ی فیبر (35×30)

7ـ ورقه کف‌پوش (35×30)

word: نوع فایل

سایز:16.0 KB

تعداد صفحه:12

خرید فایل

مطالعه بیان ژنهای کاسپاز3 وbaxدر سلولهای lncap تحت القای کمپلکس vo-salen

مطالعه بیان ژنهای کاسپاز3 وbaxدر سلولهای lncap تحت القای کمپلکس vo-salen

چکیده­

در این پژوهش کمپلکس معدنیVO-Salenو 5-Br-meso-VO-Salenاز تراکم آلدولی اتیلن دی آمین سالسیل آلدهید در حضور ترکیب وانادیوم استیل استونات سنتز گردید. ابتدا قدرت آنتی­اکسیدانی Salen به وسیله­ی آزمون DPPHمورد ارزیابی قرار گرفت، نتایج نشان داد که Salen قدرت آنتی­اکسیدانی بسیار ضعیفی در مقایسه با کمپلکس­های وانادیوم اکسید آن دارد. ارزیابی اثرات سمیت سلولی و ضد تکثیری کمپلکس­های Salen، VO-Salenو 5-Br-meso-VO-Salenنشان داد که رشد سلول­هایLNCaP بعد از 16 ساعت تیماربه ترتیب با IC₅₀ برابر با 276/736 ، 42/428 و 55/403 میکرومولار مهار گردید. جهت ارزیابی رویداد مرگ برنامه­ریزی شده­ی سلولی، بیان کمی برخی از ژن­های کد کننده­ی فاکتورهای مسیر سیگنالینگ مرتبط با آپوپتوزیس سلولی مورد بررسی قرار گرفت یافته­های حاصل از این آزمایش­ها نشان داد هر دو کمپلکسVO-Salenو 5-Br-meso-VO-Salen بیان کاسپاز 3 را به ترتیب به میزان 82/1 و 16/7 برابر القا می­کند، القای بیان ژن bak توسط VO-Salenو نیز بیان ژن bax به­وسیله­ی 5-Br-meso-VO-Salen ممکن است باعث پلیمریزاسیون پروتیئن­های Baxو Bakدر غشای میتوکندری شده و با بیان کاسپاز3 مسیر میتوکندریایی آپوپتوزیس ادامه یابد.

قسمتی از متن:

مرحله ی نسخه برداری معکوس در RT-PCR

نسخه های mRNA می توانند به طور قابل توجهی ایجاد ساختمان های ثانویه یا دایمر هایی نمایند که توانایی آنزیم نسخه بردار معکوس در تبدیل mRNA به cDNA را تحت تاثیر قرار می دهد. این امر از

دقت روش RT-PCR در تعیین کمیت mRNA های مختلف می کاهد(24).دو آنزیم نسخه­بردار معکوس رایج،AMV-RT[1]و [2]MMLV-RT هستند. AMV-RT با دوام­تر از MMLV-RT بوده و تا دمای 55 درجه­ی سانتیگراد پلیمریزاسیون قابل توجهی را حفظ می­نمایند(25) و می­تواند به رفع مشکل ایجاد ساختمان ثانویه­ی RNA کمک نماید. در مقابل MMLV-RTو مشتقات ساخته شده از آن توسط مهندسی ژنتیک به طور معنی­داری فعالیت RNase H کمتری از AMV-RT دارند. از آنجا که کاهش فعالیت RNaseH می­تواند در سنتز محصولات با زنجیره بلند موثر باشد، در صورتی که هدف از آزمایش تکثیر مولکول cDNA با اندازه­ی کامل باشد، ممکن است MMLV-RT گزینه­ی بهتری محسوب گردد(26).

مرحله­ی نسخه­برداری معکوس را می­توان با استفاده از پرایمر­های اختصاصی یا پرایمرهای الیگو دی تی[3] انجام داد. استفاده از پرایمرهای اختصاصی mRNA ، باعث کاهش تکثیر زمینه­ای[4] می­شود، حال آن­که استفاده از الیگو دی تی تعداد مولکول­های mRNA که می­توانند از یک نمونه کوچک RNA مورد آنالیز قرار گیرند را به حداکثر می­رساند. پرایمرها می­توانند باعث انحرافی بارز در تعدادکپی mRNA محاسبه شده شوند(27).

1-1-15-مرحله واکنش زنجیره­های پلیمراز در RT-PCR

رایج­ترین آنزیم DNA پلیمراز مورد استفاده DNA– پلیمرازTaq[5] است که دارای یک فعالیت نوکلئازی 3^´ → 5^´ بوده، اما فاقد فعالیت اگزونوکلئازی اصلاح خطا می­باشد. از این­رو، هنگامی که صحت

فرایند، هدف اصلی است استفاده از آن توصیه نمی­گردد. ثابت میکائیلیس آنزیم­های دیگر می­توانند تا دو برابر متفاوت از Taq پلیمراز باشند که این امر اثری مستقیم بر دمای اتصال[6] موثر پرایمر دارد(27)، اما در هر بار تغییر آنزیم، شرایط آزمایش باید بهینه گردد و نتایج به­دست آمده ممکن است مستقیما قابل مقایسه نباشند.

غلظت های Mg²⁺ و dNTP نیازمند کنترل دقیق هستند، زیرا Mg²⁺ فعالیت آنزیم را تحت تاثیر قرار داده و مخلوط های dNTP نا متعادل باعث کاهش صحت عمل پلی مراز می شوند. همچنین Mg²⁺ باعث افزایش دمای ذوب یا Tm در DNA دو رشته ای شده و تولید کمپلکس هایی محلول با dNTPs می نماید. از این رو غلظت های بالای dNTP ها در فعالیت پلی مراز اختلال نموده و اتصال پرایمر را توسط کاهش Mg²⁺ آزاد تحت تاثیر قرار می دهد(28).

1-1-16-مفاهیم Real Time PCR

1-1-16-1-خط پایه

چرخه های ابتدایی PCR که طی آن تغییر اندکی در سیگنال فلورسنس ایجاد می گردد ( معمولا چرخه های 3 تا 15 ) را خط پایه[7] می نامند. تغییرات در شرایط واکنش و محیط می تواند میزان فلورسنس تولیدی را تحت تاثیر قرار دهد. به طور کلی سطح فلورسنس در هر چاهک متناسب با میزان مولکول هدف موجود در آن است. سطوح فلورسنس ممکن است به دلیل تغییرات در محیط واکنش که ایجاد یک سیگنال زمینه ای می نماید ، دچار نوساناتی شود. سیگنال زمینه ای به ویژه طی چرخه های ابتدایی PCR و قبل از تجمع معنی دار قطعه هدف مشهود تر است. طی این چرخه های ابتدایی PCR ، سیگنال زمینه ای تمام چاهک ها برای تعیین سطح فلورسنس خط پایه در تمام تیوب های واکنش مورد استفاده قرار می گیرد. در این حالت، هدف تعیین زمانی است که تکثیر قطعه مورد نظر به طور معنی داری بیش از سیگنال زمینه ای شود. که این امر اندازه گیری دقیقتر فلورسنس را تسهیل می نماید(29).

1-1-16-2-چرخه آستانه[8]

در Real Time PCR واکنش ها توسط یک نقطه زمانی ( یا یک سیکل PCR ) مشخص می­گردد که در آن تکثیر قطعه هدف برای نخستین بار قابل تشخیص می­گردد. این معیار معمولا چرخه آستانه یا ( C_T ) نامیده می­شود و زمانی است که شدت فلورسنس تولیدی در اثر تکثیر قطعات طی واکنش زنجیره ای پلیمراز تا سطحی بالاتر از میزان نسبتا ثابت فلورسنس زمینه ای افزایش می­یابد. ملاک تعیین آستانه معمولا 10 برابر انحراف استاندارد Rn برای چرخه های اولیه PCR ( خط پایه ) است. آستانه باید در ناحیه ای قرار گیرد که PCR به صورت نمایی تکثیر می یابد. آستانه یک میزان عددی است که به هر واکنش نسبت داده شده و نشان دهنده یک نقطه از نظر آماری معنی دار در بالاتر از خط پایه محاسبه شده می باشد. برای بدست آوردن مقادیر صحیح C­_T لازم است که خط پایه دو چرخه قبل از میزان C_T­ برای فراوان ترین نمونه قرار گیرد. به دامنه غلظت های آغاز کننده نمونه که منجر به مقادیر صحیح C_T می­گردد، دامنه دینامیکی گفته می شود(30).

---

فهرست مطالب

عنوان……………………………………………………………………… صفحه

فصل اول: مقدمه و تاریخچه

1-مقدمه. 2

1 -1- سرطان. 2

1-1-1- ویژگی های اساسی سلول های سرطانی. 3

1-1-2-عامل­های سرطان. 3

1-1-3-ژنتیک سرطان. 4

1-1-3-3- ژن­های مهار کننده­ی تومور 7

1-1-5- بررسی سرطان پروستات از دیدگاه ژنتیکی. 8

1-1-6- مرگ سلولی آپوپتوزیس... 9

1-1-6-1- مسیر آپوپتوزیس... 10

1-1-6-2- مسیر خارج سلولی آپوپتوزیس... 11

1-1-6-2- مسیر داخل سلولی آپوپتوزیس... 12

1-1-6-3- تنظیم مسیر داخلی آپوپتوزیس از طریق پروتئین­های خانواده Bcl2. 13

1-1-7-ماشین آپوپتوتیک.. 15

1-1-7-1-کاسپازها و مسیرهای آپوپتوتیک.. 16

1-1-7-1-1-ساختار کاسپازها و فعالیت آنزیماتیک.. 16

1-1-7-1-2-ساختار پروکاسپازها 16

1-1-7-1-3- ساختارهای کاسپازهای فعال. 17

1-1-7-1-4-کاسپازهای عمل کننده 18

1-1-8-کمپلکس­های سالن. 19

1-1-8-1-کمپلکس­های نوع سالن. 20

1-1-8-1-1-جنبه­های عمومی کمپلکس­های سالن. 20

1-1-8-1-2-کمپلکس­های قابل حل در آب سالن. 21

1-1-8-1-3-کمپلکس آهن سالن. 21

1-1-9- Real Time PCR.. 22

1-1-10-مقایسه ی Real Time PCR و PCR معمولی. 22

1-1-11 -فازهای PCR.. 23

1-1-12-اصول RT-PCR به شیوه­ی معمولی و Real Time. 24

1-1-13- Real Time PCR یک مرحله­ای یا دو مرحله­ای. 24

1-1-14-مرحله ی نسخه برداری معکوس در RT-PCR.. 25

1-1-15-مرحله واکنش زنجیره­های پلیمراز در RT-PCR.. 26

1-1-16-مفاهیم Real Time PCR.. 27

1-1-16-1-خط پایه. 27

1-1-16-2-چرخه آستانه. 27

1-1-16-3-منحنی­های استاندارد 28

1-1-17-تئوری Real Time PCR.. 29

1-1-17-1- روش­های مختلف تعیین کمیت به وسیله­ی Real Time PCR.. 30

1-1-17-1-1-تعیین کمیت مطلق. 30

1-1-17-1-2-روش منحنی استاندارد برای تعیین کمیت نسبی. 30

1-1-17-2-منحنی ذوب و پرایمر دایمرها 30

1-1-17-2-1-پرایمر دایمرها 31

1-1-17-2-2-اثر پرایمر دایمرها بر PCR کمی. 32

1-1-18-رنگ­های متصل شونده به DNA.. 32

1-2- پیشینه­ی تحقیق. 33

فصل دوم: مواد و روش­ها

2ـ مواد و روش‌ها 42

2ـ1ـ ابزار مورد استفاده 42

2ـ2ـ رده سلولی. 42

2ـ3ـ مواد مورد استفاده 42

2ـ3ـ1ـ بافر PBS. 42

2ـ3ـ2ـ محیط کشت RPMI 1640. 43

2ـ3ـ3ـ آنتی بیوتیک.. 43

2ـ3ـ4ـ محیط کشت فریزینگ.. 43

2ـ3ـ5ـ محلولMTT. 43

2ـ3ـ6ـ بافر گلایسین. 44

2ـ3ـ7ـ محلول استوک EDTA (5/0 مولار) 44

2ـ3ـ8ـ بافر X5 TAE (Tris- Acetic acid-EDTA) 44

2-3-9- بافر بارگذاری. 44

2-3-10- پرایمرهای مورد استفاده 45

2-3-11-کیت Real Time PCR SYBR GeenI 45

2-3-12- سنتز کمپلکس VOS و 5BMVOS. 45

2-3-12-1- سنتز لیگاند شیف‌باز H₂L¹: 46

2-3-12-2- سنتز کمپلکسVOL¹: 46

2-3-12-3- سنتز لیگاند H₂L² 46

2-3-12-4- سنتز کمپلکس VOL² : 47

2-3-13- سایر مواد 47

2-4- روش­ها 48

2-4-1- تعویض محیط کشت.. 48

2-4-2- کشت مجدد سلول­ها 48

2-4-3- ذخیره و نگه­داری بلند مدت سلول­ها 49

2-4-4- حیات مجدد سلول­ها 51

2-4-5- شمارش سلول­ها با تریپان بلو 51

2-4-6- سنجش حیات سلول­ها با آزمون MTT. 52

2-4-7-استخراج RNA.. 52

2-4-8- الکتروفورز RNA بر روی ژل آگاروز 54

2-4-9-روش­های آشکار سازی RNA.. 54

2-4-10-RT-PCR.. 55

2-4-11- واکنش Real Time PCR.. 56

2-6-3- اجزای تشکیل دهنده­ی واکنش در Real Time PCR.. 56

2-7- روش مورد استفاده برای تعیین کمیت 57

فصل 3 نتایج

3- نتایج. 59

3-1- بررسی اثر آنتی اکسیدانی salen. 59

3-2بررسی اثرات سیتوتوکسیسیتی و ضد تکثیری salen، VOS و 5BMVOS بر روی لاین­های سلولی LNCaP 60

3-2-1 بررسی کسر ماندگاری سلول­ها با استفاده از آزمون MTT. 60

3-2-1-1-نتایج حاصل از آزمون MTT توسط تاثیرVOS بر روی لاین­های سلولی LNCaP. 60

3-2-1-2مطالعات مورفولوژیکی سلول­های تیمار شده با VOS استفاده از تصویربرداری با میکروسکوپ اینورت 61

3-2-2- 1- نتایج حاصل از آزمون MTT توسط تاثیر Salen بر روی لاین­های سلولی LNCaP. 62

3-2-2- 2- مطالعات مورفولوژیکی سلول­های تیمار شده با Salen 63

3-2-3-1- نتایج حاصل از آزمون MTT توسط تاثیر 5BMVOS بر روی لاین­های سلولی LNCaP. 64

3-2-3-2- مطالعات مورفولوژیکی سلول­های تیمار شده با 5BMVOS. 65

3-3- نتایج حاصل از استخراج و بارگذاری RNA بر روی ژل آگارز 66

3-4- نتایج حاصل از Real Time PCR.. 68

3-4-1بررسی منحنی ذوب مربوط به ژن GAPDH به عنوان ژن خانه­دار، کاسپاز3 ، bax و bak قبل و بعد از تیمار 68

3-4-2- منحنی استاندارد ژن GAPDH ، کاسپاز3 ، bax و bak قبل و بعد از تیمار: 70

3-4-3- منحنی تکثیر ژن­ها 71

3-4-3منحنی تکثیر ژن­های ژنGAPDH ،کاسپاز 3 ، bax و bak در دستگاه Real Time PCR از تیمار با VOS 71

3-4-4منحنی تکثیر ژن­های ژنGAPDH ،کاسپاز 3 ، bax و bak در دستگاه Real Time PCR قبل و بعد از تیمار با 5BMVOS. 72

3-4-5- نتایج حاصل از آنالیز داده­ها با استفاده از روش2^-ΔΔCt 74

3-5- نتایج حاصل از بارگذاری PCR بر روی ژل آگارز 2 درصد. 75

3-5-1-نمونه­های تیمار شده با VOS. 75

3-5-2-نمونه­های تیمار شده با 5BMVOS. 75

3-6- اثر مهاری DMSO , Salen و VOS بر روی آنزیم Taq DNA پلیمراز 76

فصل 4 : بحث و نتیجه­گیری

4- بحث.. ……….........78

منابع………….……………………………………………………………..83

خرید فایل